特殊生物显微镜

1、暗视野显微镜

• 根据丁达尔效应原理设计的一种在黑色背景条件下观察被检物体的显微镜
• 观察到明场看不到的极其微小的物体
• 最高分辨率可达0.004微米

（1）原理

• 丁达尔现象
• 微粒发光原理

（2）结构特点

• 使用中央遮光板或暗视野聚光器
• 光源的中央光束被阻挡
• 光线倾斜照射在观察的标本上
• 标本遇光发生反射或散射，散射的光线投入物镜内
• 整个视野是黑暗的

（3）优缺点

• 可分辨0.004um以上的微粒的存在和运动
• 可用以观察活细胞的结构和细胞内微粒的运动
• 只能看到物体的存在和运动，不能辨清物体的细微结构

（4）应用

• 微小粒子、细菌形态、细菌记数
• 透明标本观察

（5）暗场显微镜的要求

• 载玻片和盖玻片必须无疵痕和灰尘
• 物镜前透镜必须清洁无尘
• 载玻片和盖玻片厚度必须绝对符合要

上左图为暗场显微镜下观察到的人的血细胞；上右图为小花柳叶菜种子

2、微分干涉相差显微镜(DIC)

• 无色透明活体标本的细微结构
• 图像呈浮雕状的立体感
• 观察效果更加逼真

（1）原理

通过特制的棱镜将偏振光分解相互垂直，强度相等的光束，光束载极近的两点（小于显微镜的分辨率）上通过被检物体，从而在相位上略有差别，使图像呈现出立体三维感觉。

（2）特点

• 可以使被检物体产生三维立体感觉
• 观察效果更直观
• 无须特殊物镜，与荧光观察配合更好
• 可以调节背景和物体的颜色变化而达到理想的效果

上左图为拟南芥根；上中图为虱性车轮虫；上右图为轮虫（均在DIC显微镜下拍摄）